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1563 人参与  2023-01-04 06:37:49    点这评论
期末测验

期末测验客观题

1、质粒提取的常见方法是__。
    a、酸裂解法
    b、碱裂解法
    c、高温煮沸法
    d、液氮研磨法

2、质粒提取过程中，加入溶液iii会出现的现象是( )。
    a、出现红色絮状物，溶液变得粘稠
    b、出现丝状物，溶液变得清亮
    c、出现白色絮状沉淀
    d、溶液变成牛奶状悬浊液

3、有关提质粒的说法中错误的是( )。
    a、不管什么类型的质粒，通常都可以用试剂盒抽提
    b、不管是严谨性还是松弛型质粒，都可以用碱裂解法提取出来
    c、质粒越大，提取难度越小；质粒越小，提取难度越大
    d、一般来说，严谨性质粒的提取得率要比松弛型质粒的提取得率要低一些

4、高压灭菌锅使用前检查水位，水位一般要位于（ ）。
    a、高水位和低水位之间
    b、高水位之上
    c、低水位之下
    d、高水位之下

5、使用台式冷冻离心机离心样品时，用什么按键调节升速和降速速率？
    a、time键
    b、temp键
    c、prog键
    d、speed键

6、台式离心机快速降温应按什么键？
    a、fast temp键
    b、short键
    c、temp键
    d、start stop键

7、限制性内切酶通常保持在（）浓度的甘油中。
    a、10%
    b、20%
    c、30%
    d、50%

8、在50ul 的quickcut限制酶酶切体系中，需要加入10x quickcut buffer的量为
    a、1 ul
    b、2 ul
    c、5 ul
    d、10 ul

9、酶切反应体系中加入的内切酶的体积不能超过总体积的（）
    a、10%
    b、20%
    c、50%
    d、30%

10、用碱裂解法提取质粒dna的基本原理是：
    a、染色体dna变性后不如质粒dna复性快
    b、染色体dna断裂成碎片
    c、染色体dna分子量大不能释放
    d、染色体未与蛋白质分开而沉淀

11、提取动物肝脏基因组dna过程中，向酚-氯仿-异戊醇处理的上清液中加入无水乙醇的主要目的是（）
    a、浓缩和沉淀dna
    b、去除蛋白
    c、去除断裂的基因组dna
    d、去除rna

12、关于碱裂解法分离质粒dna的说法，错误的是（）
    a、质粒dna分子小没有变性
    b、溶液p1的作用是悬浮菌体
    c、溶液p2的作用是使dna变性
    d、溶液p5的作用是使dna复性

13、下列对 pcr 技术描述错误的是（）
    a、pcr 是在体外快速扩增特定基因的技术，其英文全称是 polymerase chain reaction
    b、pcr 技术是 mullis 于 1983 年首次提出来的
    c、mullis 因该技术的建立获得了 1993 年的诺贝尔化学奖
    d、pcr 技术只能以双链 dna 为模板扩增基因

14、pcr反应的特异性主要取决于（）
    a、dna聚合酶的种类
    b、反应体系中模板dna的量
    c、引物序列的结构和长度
    d、四种dntp的浓度

15、琼脂糖凝胶电泳胶中的dna是靠（）发出荧光的？
    a、琼脂糖
    b、溴酚蓝
    c、溴化乙锭
    d、二甲苯腈

16、在琼脂糖凝胶电泳停止时，下列哪个长度的dna分子位于凝胶（垂直放置）最下端？
    a、500bp
    b、700bp
    c、1000bp
    d、1500bp

17、dna分子构象是影响其在电泳中迁移速率的重要因素，下列迁移速率排列顺序正确的是（）
    a、线状dna>开环dna>共价闭环dna
    b、共价闭环dna>开环dna>线状dna
    c、共价闭环dna>线状dna>开环dna
    d、三者相等

18、需要atp作为辅助因子的酶是（）
    a、bamh i
    b、hind iii
    c、t4 dna 连接酶
    d、ecor i

19、有关限制性核酸内切酶的理解正确的是（）
    a、一种限制性核酸内切酶可以识别多种特定的核苷酸序列
    b、其化学本质是dna
    c、一种限制性核酸内切酶能在不同的切点上切割dna分子
    d、限制性内切酶识别序列越短，则该序列在dna序列中出现的机率越大。

20、用琼脂糖凝胶回收试剂盒回收dna时得率较低的可能原因分析不正确的是
    a、胶块溶解不完全
    b、胶块体积过大，没有用枪头捣碎
    c、回收前样品的量太多
    d、紫外灯下切胶时间过长，使dna部分降解

21、pcr 反应体系通常不包括下列哪种成分?
    a、datp、dctp、dttp、dgtp
    b、引物和模板
    c、atp
    d、dna 聚合酶和 mg2

22、有关pcr的描述，错误的是（）
    a、pcr反应是一种酶促反应
    b、一般选用94℃进行模板变性
    c、扩增的对象是dna序列
    d、扩增的对象是氨基酸

23、酒精灯中酒精的量不能超过灯壶体积的
    a、1/3
    b、1/2
    c、2/3
    d、4/3

24、分装培养基到试管中时，试管内培养基的高度一般不超过试管高度的
    a、1/4
    b、1/2
    c、1/3
    d、1/5

25、分装培养基到锥形瓶中时，分装体积一般不超过锥形瓶高度的
    a、1/2
    b、1/3
    c、1/4
    d、1/5

26、制作固体平板时，加入抗生素时所用培养基的适宜温度一般为 。
    a、20-30℃
    b、30-40℃
    c、50-60℃
    d、70-80℃

27、制作酒精棉球常用的酒精浓度为 。
    a、50%
    b、75%
    c、85%
    d、95%

28、配制lb固体培养基常用的琼脂浓度为 。
    a、1.0-2.0%
    b、4%
    c、3%
    d、0.3%

29、lb培养基灭菌的常用方法是 。
    a、紫外线消毒
    b、煮沸法灭菌
    c、高压蒸汽灭菌
    d、干热灭菌

30、琼脂在lb固体培养基中的作用是提供 。
    a、碳源
    b、氮源
    c、生长因子
    d、凝固因子

31、理想的质粒克隆载体应具有的特性有( )。
    a、分子量小
    b、多拷贝、松驰控制型
    c、具有多种常用的限制性内切酶的单酶切位点
    d、能插入较大的外源 dna 片段, 且具有容易操作的检测表型

32、有关质粒提取下列说法正确的是( )
    a、碱裂解法提取质粒dna的原理是根据共价闭合环状质粒dna与线性染色体 dna 的结构差异来实现分离的。
    b、当加入溶液溶液 iii 时，质粒 dna 能够迅速复性，出现的白色絮状沉淀是部 分断裂的和不能复性的质粒片段与细菌蛋白的混合物
    c、质粒提取得率的高低影响因素很多，但最重要的是与质粒的复制类型有关， 同等条件下严谨型的得率一般偏低些。
    d、溶液 iii 配置时冰醋酸也可以用盐酸或草酸替代，因为都是酸，只要 ph 数值能够调到大致数值即可。

33、下列试剂可用于沉淀dna的有 。
    a、异丙醇
    b、无水乙醇
    c、无水甲醇
    d、70%乙醇

34、物品在高压灭菌锅灭菌完成后，打开盖子前，务必确认以下几点：
    a、电源开关处于接通状态
    b、压力表处于0 mpa
    c、控制杆锁定指示灯不发光
    d、温度低于80度

35、移液器的停点有（）？
    a、起始停点
    b、第一停点
    c、第二停点
    d、终止停点

36、反向移液法适用于：
    a、高粘度液体的移液
    b、易起泡沫液体的移液
    c、极微量液体的转移
    d、低粘度液体的转移

37、碱裂解法提取质粒时，溶液p2中的主要成分是（）
    a、naoh
    b、sds
    c、氯仿
    d、酚

38、引物设计的注意事项下列说法正确的有（）
    a、引物 5’端序列对 pcr 影响不太大，可在引物设计时加上限制酶内切酶酶切位点。
    b、引物序列的 gc 含量一般为 40-60%为宜，且上下游引物的 gc 含量不能相差太大。
    c、引物 3’端的末位碱基对 taq 酶的 dna 合成效率有较大的影响，应当尽量避免在引物的 3’端使用碱基 a。
    d、引物序列 3’端应尽量避免出现 3 个以上的连续碱基，因为这有可能会增加错配几率。

39、下列属于loading buffer作用的是（）
    a、溶解琼脂糖
    b、增加样品比重，以确保dna均匀沉入加样孔内。
    c、预测核酸电泳的速度和位置。
    d、使样品呈色，使加样操作更方便。

40、在琼脂糖凝胶电泳检测dna实验中，某同学进行了下列操作，其中错误的是（）
    a、徒手从微波炉中取出盛有煮沸的琼脂糖溶液的三角瓶。
    b、将dna样品滴加在电泳仪的正极端。
    c、带上手套将凝胶从eb染液中取出。
    d、二甲苯腈条带跑出凝胶时停止电泳。

41、pcr反应体系中关于mg 2 浓度描述正确的是（）
    a、mg 2 浓度对taq dna聚合酶影响很大, 它可影响酶的耐热性和蛋白质的稳定性。
    b、mg 2 浓度过低，会显著降低酶活性；mg 2 浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。
    c、mg 2 浓度影响引物退火和解链温度以及引物二聚体的形成等。
    d、通常mg 2 浓度范围为0.5-2mmol/l, 1.5mm最佳。

42、关于凝胶中dna回收的说法，正确的是
    a、高盐吸附，低盐洗脱
    b、吸附柱中含有能可逆吸附dna分子的基质
    c、低ph吸附，高 ph洗脱
    d、漂洗液中含乙醇

43、有关 pcr 反应下列说法正确的有()。
    a、pcr 第一步是预变性，这个很重要，其主要作用是使得模板充分解链
    b、对于富含 gc 的序列，预变性的温度或时间可适当提高或延长，但变性温度过高或变性时间过长都会导致酶活性的损失
    c、退火温度比扩增引物的 tm 值一般低 5°c为宜，时间一般为 20-60s
    d、一般在扩增反应完成后，都需要一步较长时间(5-10 min)的延伸反应，以获得尽可能完整的产物，这对以后进行克隆或测序反应尤为重要。

44、常用的物理灭菌方法有
    a、湿热灭菌
    b、干热灭菌
    c、紫外线灭菌
    d、过滤除菌

45、培养基种类很多，一般都含有以下那些物质？
    a、无机盐
    b、碳源
    c、氮源
    d、维生素
    e、水
    f、抗生素

46、关于视频中溶液的配制，下列说法正确的是 。
    a、配制溶液时，一般先调ph，然后再定容。
    b、使用酚-氯仿-异戊醇溶液时，需要吸取下层溶液使用。
    c、配制溶液ⅰ时，可以使用0.5mol/l edta母液配制，也可以加入已称量好的edta干粉配制。
    d、配置好的50mg/ml羧苄青霉素溶液，可以直接使用，不用过滤除菌。

47、mg2 浓度会影响引物退火和解链温度以及引物二聚体的形成，但不是所有的 dna 聚合酶都需要 mg2 ，有的是 zn2 或 ca2 。

48、pcr 反应程序依次包括预变性、变性、退火、延伸、变性退火延伸多轮循环后继续延伸适当时间等几个步骤。

49、质粒在细胞内的复制一般有两种类型:严紧控制型和松驰控制型。

50、碱裂解法是质粒小量提取最常见最常用的方法。

51、一般情况下，质粒提取时得率的高低主要取决于质粒拷贝数的类型，高拷贝质粒得率相对较高，低拷贝质粒得率相对较低。

52、严紧型质粒的复制一般受到严格的控制，每个细胞中的数量只有 1~2 个，它 们似乎与染色体的复制受相同因素的控制，在一定的细胞周期内复制。

53、使用离心机时，一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。

54、电子天平使用时一定要调水平，并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。

55、高压灭菌结束后，压力降到0 mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。

56、高压灭菌锅加热用水可以数次连续使用。

57、正向移液取液时，移液器按钮按至第一停点，排出液体时，移液器按钮按至第二停点。

58、反向移液取液时，移液器按钮按至第一停点，排出液体时，移液器按钮按至第二停点。

59、用移液器分层取液时，吸取液体后不要在侧壁停靠。

60、使用台式冷冻离心机低温离心样品结束后，立即关闭电源和离心机盖子。

61、称取0.05g葡萄糖时应选择精度为0.001g的天平。

62、两种酶切割序列不完全相同，但却能产生相同的粘性末端，这类酶被称为同尾酶。

63、碱裂解法是分离质粒dna是根据质粒dna与染色体dna的分子量差异而设计的。

64、酚-氯仿-异戊醇的作用是去除核酸样品中的蛋白质，并有利于水相与有机相的分开，而且可以消除泡沫。

65、天然的质粒都是环状单链dna。

66、pcr 反应体系中模板量越多越好，可以获得更多的pcr 产物。

67、pcr反应中的引物是一小段同dna互补的rna分子。

68、琼脂糖凝胶电泳中，dna分子从负极向正极移动。

69、琼脂糖凝胶配制时，用蒸馏水充分溶解琼脂糖。

70、t4 dna连接酶对限制性内切酶切割产生的粘性末端和平末端连接效率没有区别。

71、在连接限制性内切酶酶切后的质粒和外源dna片段时，一般应该把此两种dna按1:1的摩尔比混合进行连接反应。

72、用琼脂糖凝胶回收试剂盒回收 dna时，为了提高回收 dna的浓度，可以用20微升的洗脱缓冲液进行洗脱。

73、pcr 反应体系中 4 种 dntp 的浓度应该相等, 以减少合成中由于某种 dntp 的不足出现的错误掺入。

74、pcr反应的循环过程包括变性、退火和延伸。

75、溶于乙醇的四环素溶液配制后无需灭菌即可使用。

76、配制edta溶液时，edta在碱性条件下才能溶解。

77、以水为溶剂配制的抗生素溶液需要过滤除菌后才能使用。

78、一般tris 饱和酚用于分离 dna，水饱和酚用于分离rna。

79、用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，为了达到最佳灭菌效果，可无限延长灭菌时间。

80、mg2 浓度会影响引物退火和解链温度以及引物二聚体的形成，但不是所有的 dna 聚合酶都需要 mg2 ，有的是 zn2 或 ca2 。

81、pcr 反应程序依次包括预变性、变性、退火、延伸、变性退火延伸多轮循环后继续延伸适当时间等几个步骤。

82、质粒在细胞内的复制一般有两种类型:严紧控制型和松驰控制型。

83、碱裂解法是质粒小量提取最常见最常用的方法。

84、一般情况下，质粒提取时得率的高低主要取决于质粒拷贝数的类型，高拷贝质粒得率相对较高，低拷贝质粒得率相对较低。

85、严紧型质粒的复制一般受到严格的控制，每个细胞中的数量只有 1~2 个，它 们似乎与染色体的复制受相同因素的控制，在一定的细胞周期内复制。

86、使用离心机时，一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。

87、电子天平使用时一定要调水平，并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。

88、高压灭菌结束后，压力降到0 mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。

89、高压灭菌锅加热用水可以数次连续使用。

90、正向移液取液时，移液器按钮按至第一停点，排出液体时，移液器按钮按至第二停点。

91、反向移液取液时，移液器按钮按至第一停点，排出液体时，移液器按钮按至第二停点。

92、用移液器分层取液时，吸取液体后不要在侧壁停靠。

93、使用台式冷冻离心机低温离心样品结束后，立即关闭电源和离心机盖子。

94、称取0.05g葡萄糖时应选择精度为0.001g的天平。

95、两种酶切割序列不完全相同，但却能产生相同的粘性末端，这类酶被称为同尾酶。

96、碱裂解法是分离质粒dna是根据质粒dna与染色体dna的分子量差异而设计的。

97、酚-氯仿-异戊醇的作用是去除核酸样品中的蛋白质，并有利于水相与有机相的分开，而且可以消除泡沫。

98、天然的质粒都是环状单链dna。

99、pcr 反应体系中模板量越多越好，可以获得更多的pcr 产物。

100、pcr反应中的引物是一小段同dna互补的rna分子。

101、琼脂糖凝胶电泳中，dna分子从负极向正极移动。

102、琼脂糖凝胶配制时，用蒸馏水充分溶解琼脂糖。

103、t4 dna连接酶对限制性内切酶切割产生的粘性末端和平末端连接效率没有区别。

104、在连接限制性内切酶酶切后的质粒和外源dna片段时，一般应该把此两种dna按1:1的摩尔比混合进行连接反应。

105、用琼脂糖凝胶回收试剂盒回收 dna时，为了提高回收 dna的浓度，可以用20微升的洗脱缓冲液进行洗脱。

106、pcr 反应体系中 4 种 dntp 的浓度应该相等, 以减少合成中由于某种 dntp 的不足出现的错误掺入。

107、pcr反应的循环过程包括变性、退火和延伸。

108、溶于乙醇的四环素溶液配制后无需灭菌即可使用。

109、配制edta溶液时，edta在碱性条件下才能溶解。

110、以水为溶剂配制的抗生素溶液需要过滤除菌后才能使用。

111、一般tris 饱和酚用于分离 dna，水饱和酚用于分离rna。

112、用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，为了达到最佳灭菌效果，可无限延长灭菌时间。

期末测验主观题

1、某同学要将基因x构建到质粒pcambia1300中，引物设计引入了xba i和ecori酶切位点，请按照下列信息设计酶切实验对质粒pcambia1300进行酶切，酶切总体系按照20 微升计算。（包括实验步骤和酶切反应体系）。 1. pcambia1300 多克隆位点 2. ecori 3. xba i 4. p1300质粒浓度：80 ng/ml

2、

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